Inmunohistoquímica

La inmunohistoquímica es un estudio histopatológico que se basa en la utilización de un anticuerpo específico, previamente marcado mediante un enlace químico con una enzima que puede transformar un sustrato en visible, sin afectar la capacidad del anticuerpo para formar un complejo con el antígeno, aplicado a una muestra de tejido orgánico, correctamente fijada e incluida en parafina. El complejo antígeno - anticuerpo así formado, mediante la utilización de alguna de las técnicas específicas (peroxidasa antiperoxidas, fluoresceína, etc), permite ser localizado e identificado dentro de las muestras tisulares o citológicas a estudiar, logrando la identificación de marcadores antigénicos característicos de distintas líneas de diferenciación y funcionalismo celular, con lo que se determina el tipo de célula involucrado en la muestra. 

La inmunofluorescencia por su parte, es una técnica de inmunomarcación que hace uso de anticuerpos unidos químicamente a una sustancia fluorescente para demostrar la presencia de una determinada molécula. Es una técnica que tiene variantes cuali y cuantitativas, por ejemplo FPIA dentro de las cuantitativas y la inmunotinción de células para su observación por microscopía fluorescente dentro de las cualitativas.

Estas técnicas han permitido la identificación específica de varias moléculas que se encuentran en determinadas células y/o tejidos, lo que en la clínica es de vital importancia para el diagnóstico de neoplasias indiferenciadas o enfermedades autoinmes entre otras.

Con la ayuda de estas técnicas se han determinado los siguientes marcadores específicos:

Citoqueratina: epitelios.

Vimentina: tejidos de origen mesenquimático.

Actina: tejido muscular.

S100: tejido de origen nervioso.

CD3: linfocitos T.

CD20: linfocitos B.

Calretinina: mesotelioma.

HMB 45: melanoma.

PSA: Próstata.

Aquí te mostramos imágenes de resultados positivos para marcadores específicos de tejidos a través de IHQ indirecta con sus respectivos controles negativos.

En estas imágenes se observa una corte de intestino grueso al cual se le ha realizado una inmunohistoquímica para detectar citoqueratina. En la imagen de la izquierda de observa una marca café la cual es específica para esta proteína en el citoplasma de las células epiteliales de la mucosa intestinal, mientras que el resto del tejido, ya sea el tejido conectivo subyacente o el tejido muscular de las capas inferiores no presentan marca ya que la citoqueratina sólo se presenta en tejido epitelial.

En la imagen inferior, se observa el control negativo de la inmunohistoquímica para citoqueratina, en donde no se observa ninguna marca en el tejido.

Los núcleos están contrastados con Hematoxilina.

Ahora se observa un corte de riñón con una reacción inmunohistoquímica positiva para vimentina. Se observa marca específica en los fibroblastos del tejido conectivo y en los vasos sanguíneos. El tejido epitelial cúbico característico de los túbulos renales no presenta marca para esta proteína.


En inferior, se observa el control negativo para esta IHQ.

Citogenética aplicada al diagnóstico

La citogenética es el estudio de los cromosomas y de las enfermedades relacionadas, causadas por un número o una estructura anómalos de los cromosomas. Los cromosomas son estructuras complejas ubicadas en el núcleo de las células, compuestos por DNA, histonas y otras proteínas, RNA y polisacáridos. Son básicamente los "paquetes" que contienen el DNA. Normalmente los cromosomas no se pueden ver con un microscopio óptico, pero durante la división celular se condensan lo suficiente como para poder ser fácilmente analizados a 1.000 aumentos. 

Para obtener células con sus cromosomas en este estado condensado, se las expone a un inhibidor de la mitosis, que bloquea la formación del huso mitótico y detiene la división celular en la etapa de metafase.

Se pueden usar distintos tejidos para obtener preparaciones de cromosomas; por ejemplo, sangre periférica, medula ósea, fluido amniótico y productos de la concepción. Aunque las técnicas específicas difieren según el tejido usado, el método básico para obtener preparaciones de cromosomas es así:
· Recolección de la muestra y preparación inicial.
· Cultivo celular.
· Adición de un inhibidor de la mitosis para detener las células en metafase.
· Recogida de las células. Este paso es muy importante para obtener preparaciones de alta calidad. Implica exponer las células a una disolución hipotónica, seguida de una serie de disoluciones fijadoras. Esto hace que las células se expandan, de modo que los cromosomas se extiendan y puedan examinarse individualmente.
· Tinción de las preparaciones cromosómicas para detectar los posibles cambios numéricos y estructurales.

  

Utilidad
· Análisis de cromosomas in vitro.
· Alteraciones cromosomicas.
· Numéricas.
· Estructurales.
· Diagnóstico y terapia citogenética.

Hoy en día, el uso de varias técnicas citogenéticas han permitido el diagnóstico de enfermedades producidas por alteraciones cromosómicas o genéticas, facilitando la elección de un tratamieno y mejorando la calidad de vida de los pacientes.

A continuación te presentamos las técnicas citogenéticas que hoy en día contribuyen al diagnóstico clínico de enfermedades cromosómicas y/o génicas.

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Anatomía Patológica

La anatomía patológica es la parte de la ciencia que se encarga del estudio de las lesiones celulares, tejidos, órganos, de sus consecuencias estructurales y funcionales y por tanto de las repercusiones en el organismo.

Constituye un área fundamental en el desarrollo profesional del Tecnólogo Médico de esta mención, debido a que en este curso se relacionan los distintos mecanismo de daño o injuria a los tejidos con una determinada respuesta patológica, lo cual tiene una gran significancia clínica, puesto que indica que trastorno está sufriendo el paciente o el estadío de una determinada enfermedad haciendo posible poner en práctica el tratamiento más adecuado.

A continuación, te presentamos los conceptos más importantes de la Anatomía Patológica para que repases o si eres nuevo en esta área, aprendas y apliques algunos conceptos.